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Enzimas para la caracterización exhaustiva de anticuerpos

Los anticuerpos terapéuticos utilizados como biofármacos son moléculas muy complejas que requieren un seguimiento y un control estrictos durante su fabricación. Debido a su naturaleza de fármaco biológico, la seguridad del medicamento y la variación innata de los métodos de producción son siempre motivo de preocupación. Por lo tanto, para analizar y caracterizar la calidad del producto se deben aplicar una serie de flujos de trabajo para una caracterización analítica exhaustiva y en profundidad.
<div class="public_text_dec theme"Con la aprobación cada vez mayor de productos de anticuerpos monoclonales, como mAbs, fusiones Fc, Fab, conjugados anticuerpo-fármaco, mAbs biespecíficos (bsAbs) y captadores de células T biespecíficos (BiTE), el conocimiento de las modificaciones postraduccionales (PTM) individuales puede ofrecer una mejor perspectiva y predicción de la eficacia in vivo , la farmacocinética y el mecanismo de acción de los Abs fabricados.

Lista de Productos

Product DetailsCat. No.Unit Definition
Endo H (500U/μl)ENH-S5116One unit is defined as the amount of enzyme required to remove >95% of the carbohydrate from 10µg of denatured RNase B in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 10µl.
Endo S (200U/μl)ENS-S5143One unit deglycosylates ≥ 95% of 1 μg human IgG, when incubated in 10 mM sodium phosphate, 150 mM NaCl, pH7.4 at 37°C for 30 min.
SpeB (40U/μl)SPB-S5115One unit digests ≥ 95% of 1 µg human IgG1 when incubated in PBS ith 5 mM DTT or TCEP, pH 7.4 at 37°C for 1 hour.
IdeS (20U/μl)IDS-S5143One unit digests ≥ 95% of 1 μg human IgG when incubated in 10 mM sodium phosphate, 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, pH7.4 at 7°C for 30min.

Herramientas para el análisis de glicanos

Herramientas para el análisis de glicanos
La estructura y el tipo de los glicanos ligados al N pueden afectar a la inmunogenicidad, la farmacocinética y la farmacodinámica de proteínas terapéuticas como los anticuerpos monoclonales (mAbs) y las proteínas de fusión Fc. Enzimas como Endo H y Endo S proporcionan escisiones específicas de tipo de glicanos ligados a N para su posterior análisis.

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

Aplicación:

Endo H escinde oligosacáridos híbridos o con alto contenido en manosa ligados a asparagina (ligados a N), pero no oligosacáridos complejos.
Desdoblamiento de N-glicanos con alto contenido en manosa o híbridos
 
 

Endo H (500U/μl) (Cat .No. ENH-S5116)

Características del Producto:

Acción selectiva: No escinde glicanos complejos
pureza ≥95%, determinada por SDS-PAGE  
PH óptimo: 5-6
Tiempo de reacción: 1 h

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

Aplicación:

Endo S escinde preferentemente oligosacáridos complejos y evita la escisión de oligosacáridos híbridos o con alto contenido en manosa ligados a asparagina (ligados a N).
Desdobla glicanos complejos, actividad limitada en glicanos de alto contenido en manosa y de tipo híbrido.

Endo S (200U/μl) (Cat .No. ENS-S5143)

Características del Producto:

Endoglicosidasa específica de IgG altamente eficaz
pureza ≥95% determinada por SDS-PAGE
Tiempo de reacción: 30 min

Fragmentación de subunidades de anticuerpos

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

Aplicación:

La enzima SpeB digiere la IgG para generar fragmentos Fab y Fc. Los fragmentos Fab purificados y homogéneos pueden utilizarse en muchas aplicaciones, entre ellas:
Estudio de la unión monovalente de los fragmentos Fab al antígeno.
Eliminación de las funciones efectoras mediadas por Fc.
Reducción de la unión inespecífica de las interacciones Fc.
 

SpeB (40U/μl) (Cat. No. SPB-S5115)

Características del Producto:

Sitio de escisión (IgG1 humana): KTHT / CPPCPAP (por encima de la bisagra)
Tiempo de reacción: 60 min

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

Aplicación:

La proteasa IdeS escinde específicamente las IgG por debajo de la región bisagra en fragmentos F(ab')2 y Fc.

IdeS (20U/μl) (Cat. No. IDS-S5143)

Características del Producto:

Sitio de escisión (IgG1 humana): CPAPELLG / GPSVF (debajo de la bisagra)
Tiempo de reacción: 30 min
 
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